《鬼武者：剑之道》的故事主角是宫本武藏，他为了追求更高的剑道境界来到京都，却因鬼之笼手被卷入与幻魔相关的死斗之中。武藏的战斗既有正面交锋的狠劲，也牵动着鬼族力量和京都异变的秘密。除了主角之外，游戏中还会出现协助武藏的帮手、与他对峙的强敌，以及各种危险的幻魔。

主角宫本武藏

宫本武藏是血气方刚的武者，为了在剑道上登峰造极而现身京都。他由CaoZhen（曹真）担任中文配音，面部模型来自三船敏郎。看似单纯追求剑术的修行之路，接下来却会变得曲折又离奇。

帮手鬼之佳人

鬼之佳人寄宿在武藏的鬼之笼手中，是一名会在关键时刻协助他的鬼族女性。她平时隐藏在笼手之内，需要时也会现身登场，中文配音演员为LiChanFei（李蝉妃）。

帮手小野篁

小野篁是在鬼之佳人的引导下与武藏相识的人物。虽然年事已高，但剑术依旧高超，斩除幻魔时不费吹灰之力。他似乎也佩戴着鬼之笼手，中文配音演员为MengXiangLong（孟祥龙）。

帮手出云阿国

出云阿国是一名因某个原因必须打倒幻魔的少女，她为了寻求力量而找上小野篁。她曾经凭借倾奇舞红极一时，如今却暂停了表演，中文配音演员为XieYing（谢莹）。

强敌佐佐木岩流

佐佐木岩流是一位武艺高手，也以佐佐木小次郎之名广为人知。他与武藏似乎有着很深的因缘，而且和武藏一样，手臂上也有鬼之笼手，中文配音演员为ZhangPei（张沛）。

强敌酒吞童子

酒吞童子是盘踞在大江山的魁梧幻魔，臭名昭彰且无恶不作。他自称传说中的妖怪酒吞童子，但真实身份似乎并不简单，中文配音演员为GaoSiHang（高嗣航）。

强敌大唾拉

大唾拉拥有巨大的身躯，能轻易挥舞沉重武器，并以横冲直撞的方式压制敌人。它仿佛永远处于饥饿状态，对进食有着近乎癫狂的执着，中文配音演员为SuXin（苏鑫）。

强敌道狂

道狂藏身于京都地下的研究所中，专注于创造新的幻魔。他的言行举止令人胆寒，只要看过研究所内部，就能明白他的兴趣相当扭曲，中文配音演员为XuHui（徐慧）。

强敌大鵺

大鵺是由道狂创造出的幻魔，行动方式带着野兽般的猛烈感。它不仅能用迅捷动作发起攻击，还拥有操控雷电的能力，是非常危险的敌人。

幻魔一目笠

一目笠是能够使用刀剑、弓箭与盾牌的幻魔，经常三五成群一起进攻。它们喜好残杀和啃食人类，贪欲无穷，行事也十分肆意妄为。

幻魔胧乌

胧乌外观看起来酷似忍者，能够洞察武藏的攻击招式，并寻找机会反扑。若是同时遭遇两只胧乌联手进攻，稍有松懈就可能陷入极大危险。